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從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法與流程

文檔序號:11210968閱讀:1213來源:國知局
從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法與流程

本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物分離純化技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法。



背景技術(shù):

據(jù)世界衛(wèi)生組織報告[edwardsbk,etal.cancer,2014,120(9):1290-1314.],全世界每年死于癌癥的病人約700萬人左右,未來10年,癌癥發(fā)病率與死亡率仍將繼續(xù)攀升。目前,我國癌癥發(fā)病率在最近幾年持續(xù)升高,據(jù)統(tǒng)計,每年新增癌癥病人250萬人,治療費用在1500億以上[globocan:iarc,2014.siegelrl,etal.ca:acancerjournalforclinicians,2015,65(1):5-29.]。其中,結(jié)直腸癌(colorectalcancer,crc)是全世界發(fā)病率和死亡率最高的癌癥之一。眾所周知它是第三常見的腸癌。最近,結(jié)腸癌的發(fā)病率持續(xù)升高主要是因為飲食習(xí)慣的改變。因此,飲食對于結(jié)腸癌的預(yù)防尤為重要。眾多藥理學(xué)研究表明天然產(chǎn)物對于預(yù)防癌癥具有重要作用?;瘜W(xué)療法在治療癌癥的同時會產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。大量的植物被用來研究其抗癌作用以便替代合成藥,事實上,很多植物在民間被用來治療各種疾病,這與其高效和安全是分不開的。因此越來越多的抗癌藥物從植物中獲取保持著持續(xù)增長的趨勢。據(jù)統(tǒng)計,在美國2014年大約有71830男性和65000女性患有結(jié)腸癌,26270男性和24040女性死于結(jié)腸癌疾病[siegelr,etal.ca:acancerjournalforclinicians,2014,64(2):104-117.]。

油茶(camelliaoleiferaabel)屬于山茶科,是一種經(jīng)濟(jì)價值很高的樹種,同時也是世界四大木本油料之一,主要集中在我國南部地區(qū)像廣西、湖南、以及江西等省[huj,etal.pakistanjournalofbotany,2016,48(3):899-905.]。之前的生物活性研究揭示油茶全株具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用、抗炎、抑菌、驅(qū)蟲、止咳、抗氧化以及抗癌等活性[hujl,etal.internationaljournaloffoodscience&technology,2012,47(8):1676-1687;sugimotos,etal.chemicalandpharmaceuticalbulletin,2009,57(3):269-275;chenl,etal.fitoterapia,2013,84:123-129;chengyt,etal.journalofagriculturalandfoodchemistry,2014,62(3):642-650;hujl,etal.journalofthescienceoffoodandagriculture,2012,92(12):2443-2449;yey,etal.internationaljournalofnanomedicine,2014,9:4475.]。

茶蒲,也稱為油茶果殼,是油茶果實分離茶籽的副產(chǎn)物,大部分被當(dāng)做垃圾扔掉或者當(dāng)做燃料燃燒。對其化學(xué)成分并未提取和開發(fā),這不僅造成資源的嚴(yán)重浪費,而且對環(huán)境也造成了污染。齊墩果烷型三萜皂苷,具有抗炎、抗癌以及神經(jīng)保護(hù)的作用。但是,從油茶蒲中提取齊墩果烷型三萜皂苷的研究尚未見報道。



技術(shù)實現(xiàn)要素:

本發(fā)明的目的是提供一種從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法,可以從油茶蒲中分離提取得到齊墩果烷型三萜皂苷。本發(fā)明的另一個目的是提供27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷的抗腫瘤活性功效用途。

為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供的從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法是這樣實現(xiàn)的:

一種從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷,其結(jié)構(gòu)式如下:

從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷的制備方法,包括如下步驟:

油茶蒲粉碎經(jīng)超聲波提取、減壓濃縮成粗浸膏;所述粗浸膏用水打散成懸浮液,經(jīng)溶劑萃取、減壓濃縮制成萃取后的浸膏;所述萃取后的浸膏溶解進(jìn)行大孔樹脂色譜分離,特征餾分濃縮;濃縮的特征餾分經(jīng)溶解靜置后離心,再經(jīng)熱溶解,結(jié)晶后得從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷。

可選的,所述粉碎后油茶蒲超聲波提取液為濃度為50%-90%的乙醇,料液比為:1:1-30。

可選的,所述萃取劑為飽和的正丁醇或正丙醇。

可選的,溶解所述萃取后的浸膏的溶液是濃度為1%-20%的乙醇或甲醇溶液;所述大孔樹脂色譜分離是使用20%-100%的乙醇或甲醇洗脫液梯度洗脫。

可選的,所述特征餾分是經(jīng)tlc檢測確定其中含有三萜類物質(zhì)的餾分。

可選的,溶解所述濃縮的特征餾分的溶液是:濃度為80-100%的甲醇或乙醇溶液,靜置的溫度是3-5℃。

可選的,所述熱溶解的溶劑為:正丁醇、石油醚、氯仿、乙醇、甲醇、乙酸乙酯或丙酮中的兩種或三種的混合物。

可選的,所述熱溶解時,加入吸附劑。

本發(fā)明利用萃取、柱色譜以及結(jié)晶等方法快速從油茶蒲中分離得到一種新的齊墩果烷性三萜皂苷,該方法簡易、高效、投資少,使用油茶蒲作為原料相對于現(xiàn)有技術(shù)齊墩果烷型三萜皂苷的制備來說成本低,且適合大規(guī)模生產(chǎn)。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實施例一從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷的質(zhì)譜圖;

圖2是本發(fā)明實施例一從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷的氫譜圖;

圖3是本發(fā)明實施例一從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷的碳譜圖;

圖4是本發(fā)明實施例一從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷的hmbc譜圖;

圖5不同濃度齊墩果烷型三萜皂苷對ht-29細(xì)胞和hek293細(xì)胞增殖作用的影響。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白,以下實施例,對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。

本發(fā)明從油茶蒲中提取的齊墩果烷型三萜皂苷結(jié)構(gòu)式如下:

分子式為c48h78o18,化學(xué)名為化合名為:27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷,其對應(yīng)英文名為:27-hydroxy-28-o-β-d-glucopyranosyloleanolate3-o-[a-l-,rhamnosyl(1”→2')]-β-d-glucopyranoside。該化合物為白色,其熔點為(mp):228—230℃,紫外光譜分析其在218nm有最大吸收,紅外光譜分析顯示在3350cm-1(oh)、2969cm-1(ch2)、1723cm-1(coor)、1600cm-1(co)、1342cm-1(ch3)處有吸收,esi-msm/z[m-h]-為941。

從油茶蒲中提取上述化合物的方法如下:

(1)將干燥的油茶蒲粉碎,粉碎后過100目篩,按料液比1:1-30加入體積百分濃度為50%-90%的乙醇水溶液,超聲波提取1-5次,每次10-60分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

其中,料液比優(yōu)選地選擇是1:10-20,乙醇水溶液體積濃度優(yōu)選地是80%-90%,超聲波提取優(yōu)選地是3-4次,每次20-30min,提取溫度是40℃。超聲波功率在50-100w。

(2)將超聲波提取后的浸膏加入少量水超聲振蕩成懸浮液,使用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)3-5次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

作為萃取劑的有機(jī)溶劑是:飽和的正丁醇或者正丙醇。

(3)將萃取后的浸膏用含有1%-20%的乙醇或甲醇溶液溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,使用20%-100%的乙醇或甲醇溶液梯度洗脫;洗脫液經(jīng)薄層色譜(thinlayerchromatography,tlc)檢測,有紫色斑點的洗脫液即確定含有三萜類物質(zhì),確定為特征餾分;收集特征餾分,將具有相同特征的餾分濃縮至原料的0.05-0.1倍。

本發(fā)明收集的特征餾分是收集60%-80%乙醇段或甲醇段餾分,所述原料是收集的特征餾分總量。

(4)在濃縮的特征餾分中加入質(zhì)量為其1-5倍的濃度為80%-100%的乙醇或甲醇溶液,在3-5℃下靜置30min-60min,然后離心,離心機(jī)轉(zhuǎn)速4000r/min,離心時間30min;離心后的固體加入有機(jī)溶劑熱溶解,并加入吸附劑吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,制得27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

其中,加入有機(jī)溶劑的量是離心后固體的7-10倍,有機(jī)溶劑選擇正丁醇、石油醚、氯仿、乙醇、甲醇、乙酸乙酯或丙酮中的兩種或三種的混合物,兩種或三種有機(jī)溶劑按比例混合;優(yōu)選氯仿與甲醇混合,混合比例1:3,使用量是離心固體的10倍;優(yōu)選氯仿與甲醇混合,混合比例1:4,使用量是離心固體的8倍;優(yōu)選氯仿與甲醇混合,混合比例1:3,使用量是離心固體的10倍;優(yōu)選正丁醇、石油醚和丙酮混合,混合比例1:1:1,使用量是離心固體的9倍;優(yōu)選乙醇和乙酸乙酯混合,混合比例2:1,使用量是離心固體的7倍;優(yōu)選氯仿、甲醇和乙醇混合,混合比例1:1:2,使用量是離心固體的10倍。

其中吸附劑選擇活性炭、活性氧化鎂或活性硅藻土,優(yōu)選活性炭。

以下通過實施例詳細(xì)說明本發(fā)明提供的齊墩果烷型三萜皂苷及其制備方法。

實施例一

取500g粉碎的油茶蒲,按料液比1:10(g/ml)的比例加入體積百分濃度80%的乙醇水溶液,超聲波提取5次,每次20分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用正丁醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)3次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有10%的乙醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的乙醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測80%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集80%乙醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.05倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為濃縮液5倍的濃度為98%的乙醇,放置在4℃的冰箱中靜置12h,離心過濾后,加入10倍量的氯仿和甲醇按1:3混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性炭吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)0.324g。

經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。鑒定數(shù)據(jù)如表1所示。

表1.27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷的1h-nmr(400mhz)和13c-nmr(100mhz)譜數(shù)據(jù)(c5d5n)

由電噴霧電離質(zhì)譜(esi-ms)分析該物質(zhì)的分子量為942,如圖1所示;結(jié)合氫譜和碳譜得出其分子式為c48h78o18,不飽和度為10,1h-nmr數(shù)據(jù)如圖2和表一所示,顯示7個甲基[δh0.83(h-25),1.08(h-24),0.85(h-30),0.96(h-29),1.11(h-6”),0.98(h-26),1.27(h-23)],1個烯鍵質(zhì)子[δh5.30(1h,s,h-12)],3個糖端基質(zhì)子[δh4.85(1h,d,j=13.1hz,h-1'),5.32(1h,d,j=7.8hz,h-1”),6.02(1h,d,j=7.8hz,h-1”')]。13c-nmr中如圖3和表一所示,30個碳信號可歸屬于苷元,另外18個碳信號可歸屬于3個六碳糖,這是典型的齊墩果烷型骨架。如圖4所示,hmbc譜中,δc139.05和δh5.30(h-12)、0.98(h-26)、2.65(h-18)、1.34(h-19),δc128.2和δh2.01(h-11)、0.98(h-26)、2.65(h-18),1.34(h-19),δh5.30和δc24.41(c-11)、139.05(c-13)、41.90(c-18)、39.75(c-19)的相關(guān)信號證實雙鍵位于12位。一對雙鍵碳信號出現(xiàn)在δc139.05(c)和128.20(ch),與化合物齊墩果酸的核磁數(shù)據(jù)進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),c-12和c-13化學(xué)位移右移,而c-27處為ch2信號,說明c-27被羥基取代。酸水解和手性gc-ms分析證實含有d-吡喃葡萄糖和鼠李糖。c-3和c-28處的化學(xué)位移分別出現(xiàn)在δc88.90和176.76,這說明化合物是一個雙糖鏈三萜皂苷。這一點也被δh4.85(h-1')和δc88.90(c-3),δh6.02(h-1”')和δc176.76(c-28)的hmbc相關(guān)信號證實。δh5.32(h-1”)和δc80.21(c-2')的hmbc相關(guān)信號說明glcii連接在glci的c-2′位。因此,化合物被鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

實施例二

取1000g粉碎的油茶蒲,按料液比1:20(g/ml)的比例加入體積百分濃度90%的乙醇水溶液,超聲波提取3次,每次30分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用正丙醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)3次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有15%的乙醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的乙醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測60%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集60%乙醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.07倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為特征餾分濃縮液4倍的濃度為80%的乙醇,放置在4℃冰箱中靜置12h,離心過濾后,加入8倍量的氯仿和甲醇按1:4混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性炭吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)0.748g,經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

實施例三

取2000g粉碎的油茶蒲,按料液比1:30(g/ml)的比例加入體積百分濃度95%的乙醇水溶液,超聲波提取4次,每次10分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用正丁醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)3次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有5%的乙醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的乙醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測60%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集60%乙醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.06倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為特征餾分濃縮液3倍的濃度為95%的乙醇,放置在3℃冰箱靜置50min,離心過濾后,加入10倍量的氯仿和甲醇按1:3混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性炭吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)2.069g,經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

實施例四

取1000g粉碎的油茶蒲,按料液比1:20(g/ml)的比例加入體積百分濃度85%的乙醇水溶液,超聲波提取3次,每次30分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用有正丙醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)4次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有1%的甲醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的甲醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測70%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集70%甲醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.1倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為特征餾分濃縮液2倍的濃度為80%的乙醇,放置在5℃冰箱中靜置12h,離心過濾后,加入9倍量的正丁醇、石油醚和丙酮按1:1:1混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性氧化鎂吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)0.723g,經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[β-d-葡萄糖基(1”→6')]-β-d-葡萄糖苷。

實施例五

取2000g粉碎的油茶蒲,按料液比1:1(g/ml)的比例加入體積百分濃度99%的乙醇水溶液,超聲波提取5次,每次50分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用正丁醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)5次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有20%的甲醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的乙醇或者甲醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測75%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集75%甲醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.08倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為特征餾分濃縮液1倍的濃度為95%的乙醇,放置在4℃冰箱靜置12h,離心過濾后,加入7倍量乙醇和乙酸乙酯按2:1混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性硅藻土吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)1.989g,經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

實施例六

取500g粉碎的油茶蒲,按料液比1:5(g/ml)的比例加入體積百分濃度50%的乙醇水溶液,超聲波提取5次,每次50分鐘,過濾,減壓濃縮成超聲波提取后的浸膏。

在超聲波提取后的浸膏中加入少量水超聲震蕩成懸浮液,使用正丁醇進(jìn)行萃取,萃取次數(shù)4次,減壓濃縮成萃取后的浸膏。

萃取后的浸膏用含有5%的乙醇進(jìn)行溶解,進(jìn)行大孔樹脂柱色譜分離,用20—100%的甲醇梯度洗脫,洗脫液經(jīng)tlc檢測65%乙醇段餾分顯色有紫色斑點,收集65%甲醇段餾分作為特征餾分,將特征餾分濃縮至原料的0.09倍。

向特征餾分濃縮液中加入質(zhì)量為濃縮液3倍的濃度為98%的乙醇,放置在4℃的冰箱中靜置12h,離心過濾后,加入10倍量的氯仿、甲醇和乙醇按1:1:2混合的有機(jī)溶劑熱溶解,并加入活性硅藻土吸附除雜,過濾,反復(fù)結(jié)晶,得白色粉末狀物質(zhì)0.324g。經(jīng)質(zhì)譜與核磁共振譜鑒定為27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷。

如下提供本發(fā)明制備的齊墩果烷型三萜皂苷用途實驗。

1.待評價樣品:上述制備的27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷的抗腫瘤活性評價。

2.試驗方法:

(1)ht-29與hek293細(xì)胞購買于美國典型培養(yǎng)物保藏中心(atcc)。將ht-29細(xì)胞置于含10%胎牛血清的dmem培養(yǎng)基中,于37℃、5%co2培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),每三天傳代一次。細(xì)胞復(fù)蘇后,傳至4代后方可用于建模。

(2)mtt實驗分析單體化合物對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響:取對數(shù)生長期且細(xì)胞形態(tài)生長良好的ht-29細(xì)胞,棄去舊培養(yǎng)基,胰蛋白酶消化輕輕吹打后,采用臺盼藍(lán)法在顯微鏡下細(xì)胞計數(shù),按照每孔1×106的濃度接種于96孔板中,每孔加入100μl,于37℃、5%co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,棄去舊培養(yǎng)液,初始加入100μldmem培養(yǎng)液,然后加不同濃度的樣品溶液,空白對照組則加含0.1%dmso的完全培養(yǎng)基,處理48h,吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液,加入100μlmtt溶液培養(yǎng)4小時后,加入mtt終止液繼續(xù)培養(yǎng)16-20個小時,酶標(biāo)儀下測其吸光度。按照以下計算細(xì)胞存活率:細(xì)胞存活率=(空白組od值-樣品組od值)/空白組od值×100%。

3.實驗結(jié)果:

本實驗采用mtt比色法檢測27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷對ht-29細(xì)胞增值活性的效應(yīng)。由圖5所示,隨著給藥濃度的增加,與空白對照組相比,ht-29細(xì)胞細(xì)胞存活率顯著下降,且呈一定的濃度依賴關(guān)系。而對正常hek293細(xì)胞影響不顯著,當(dāng)給藥濃度為25μg/ml時最強(qiáng),其細(xì)胞存活率為28.66%。實驗結(jié)果充分說明27-羥基-28-o-β-d-葡萄糖基-齊墩果烯-3-o-[a-l-鼠李糖基(1”→2')]-β-d-葡萄糖苷具有顯著的抗腫瘤作用,可廣泛應(yīng)用在抗腫瘤藥品、食品和保健品等產(chǎn)品中。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已,并不用以限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

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